國(guó)家非洲豬瘟參考實(shí)驗(yàn)室
為指導(dǎo)養(yǎng)豬場(chǎng)做好非洲豬瘟監(jiān)測(cè)工作,及時(shí)發(fā)現(xiàn)非洲豬瘟病毒特別是變異株感染情況,提升非洲豬瘟防控能力,特制定本技術(shù)指南。
一、非洲豬瘟變異株的定義
非洲豬瘟變異株包括基因缺失株、自然變異株、自然弱毒株等,與2018年傳入的非洲豬瘟毒株相比,該類毒株的基因組序列、致病力等發(fā)生明顯變化。生豬感染該類毒株后,潛伏期延長(zhǎng),臨床表現(xiàn)輕微,后期可出現(xiàn)關(guān)節(jié)腫脹、皮膚出血型壞死灶,感染母豬產(chǎn)仔性能下降、死淘率增高,出現(xiàn)流產(chǎn)死胎/木乃伊胎等。與傳統(tǒng)的流行毒株相比,生豬感染該類毒株后排毒滴度低、間隙性排毒,難以早期發(fā)現(xiàn)。
二、監(jiān)測(cè)方法
?。ㄒ唬┘訌?qiáng)臨床巡視
時(shí)刻關(guān)注豬場(chǎng)各個(gè)環(huán)節(jié)豬只異常情況,想方設(shè)法提升飼養(yǎng)人員責(zé)任心,一旦發(fā)現(xiàn)豬只出現(xiàn)嗜睡、輕觸不起、采食量減少,發(fā)熱、皮膚發(fā)紅、關(guān)節(jié)腫脹/壞死、咳喘、腹式呼吸,育肥豬死淘率增高,母豬流產(chǎn)或出現(xiàn)死胎/木乃伊胎等可疑臨床表現(xiàn)時(shí),應(yīng)第一時(shí)間采樣檢測(cè)。
?。ǘ└倪M(jìn)主動(dòng)監(jiān)測(cè)
每周對(duì)豬群進(jìn)行病原和抗體檢測(cè)。在豬群進(jìn)行疫苗接種、轉(zhuǎn)群、去勢(shì),或母豬分娩后,應(yīng)進(jìn)行采樣檢測(cè)。豬場(chǎng)出現(xiàn)風(fēng)險(xiǎn)暴露或周邊豬場(chǎng)出現(xiàn)感染時(shí),按需進(jìn)行采樣檢測(cè)。
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對(duì)可疑豬的同舍和關(guān)聯(lián)舍豬群,采集深部咽拭子和抗凝血,進(jìn)行病原檢測(cè),必要時(shí)采集血清進(jìn)行抗體檢測(cè)。對(duì)可疑豬及臨近豬接觸的地面、欄桿,以及舍內(nèi)人員接觸的物品等,采集環(huán)境樣品進(jìn)行病原檢測(cè)。病原檢測(cè)如果混檢,建議混樣數(shù)量不超過(guò)5個(gè);抗體檢測(cè)不得混樣。
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對(duì)可疑豬,按檢出概率高低排序,依次采集深部咽拭子、淋巴結(jié)(微創(chuàng)采集)、前腔靜脈抗凝血(EDTA)或尾根血、口鼻拭子。
對(duì)分娩母豬,應(yīng)采集臍帶血、胎衣;對(duì)死胎和流產(chǎn)胎兒,應(yīng)采集淋巴結(jié)、脾臟等組織樣品。
對(duì)病死豬,優(yōu)選采集部位為淋巴結(jié)、脾臟、骨髓和肺臟。
血清樣本,按常規(guī)方法制備。
三、檢測(cè)方法
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采用非洲豬瘟病毒(P72/CD2v/MGF)三重?zé)晒釶CR方法檢測(cè)核酸,詳見(jiàn)“農(nóng)辦牧〔2020〕39號(hào)”附件《非洲豬瘟病毒流行株與基因缺失株鑒別檢測(cè)規(guī)范》。必要時(shí)可測(cè)序鑒別。
(二)抗體檢測(cè)方法
采用間接ELISA、阻斷ELISA等方法檢測(cè)抗體水平,詳見(jiàn)《非洲豬瘟診斷技術(shù)》(GB/T 18648)。